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核酸蛋白检测仪与紫外分析仪的定义和联系

发布日期 : 2017-11-02     作者 :     来源 :
核心提示 : 核酸蛋白检测仪与紫外分析仪的定义和联系

核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。

核酸蛋白检测仪其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

紫外分析仪

紫外检测原理基于被测组分和背景电解质的吸光度不同,当被检测组分通过检测窗时,吸光度发生变化服从朗伯-比尔定律,即在一定的实验条件下,吸光度与被测组分的浓度成正比。

紫外分析仪用于核酸蛋白检测

紫外-可见光分光光度计在生物科技中可用于测定核酸和蛋白质的浓度。

首先,核酸的基本结构单位是核苷酸。核苷酸由一个含氮碱基(嘌呤或嘧啶),一个戊糖(核糖或脱氧核糖)和一个或几个磷酸组成。由于核酸的碱基具有共轭双键,因而有紫外吸收的性质。各种碱基、核苷和核苷酸的吸收光谱略有区别。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于测定核酸。根据260nm与280nm的吸收光度(A260)可判断核酸纯度。

再谈蛋白质,构成它的组成是氨基酸,其中的种类包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸,这几种芳香族氨基酸的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。所以,紫外吸收法是280 nm 的光吸收法,含有核酸的蛋白质溶液使用280 和260 nm 的吸收差法较好。蛋白质的稀溶液采用215 与225 nm 的吸收差法。

此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。

还有一些测定蛋白质的方法,是通过蛋白质与一些物质的作用产生颜色,然后在此有色光光谱内测定吸光度。将已知浓度的蛋白质溶液稀释几个倍数,与物质作用后作为标准品,测定吸光度做出一条曲线,然后未知溶液的浓度就可通过吸光度来得出。这些方法包括,凯氏定氮法,考马斯亮蓝法(Bradford),Folin-酚试剂法(Lowry法)和BCA法。




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